重组蛋白的几种表达系统介绍
发布时间:2022-07-29 点击次数:1163
重组蛋白是应用重组DNA或重组RNA的技术,从而获得具有一定功能和活性的蛋白质,是研究生物学过程的重要工具,被广泛应用于蛋白结构研究、细胞功能试验、免疫检测试剂、重组蛋白药物、诊断试剂开发等众多领域。
体外重组蛋白的生产主要包括四大系统:原核蛋白表达,哺乳动物细胞蛋白表达,酵母蛋白表达及昆虫细胞蛋白表达。
重组蛋白表达系统介绍:
(1)目前应用较广泛的表达系统有三大类,大肠杆菌(Esherichia coli)表达系统、酵母表达系统、CHO细胞表达系统。其中,大肠杆菌是表达重组蛋白常用的宿主菌,已应用于许多具有重要药用价值蛋白的生产。大肠杆菌表达系统具有许多优点,如生长快、培养成本低、遗传背景清楚和易实现高密度培养等。大肠杆菌DH5α是一种诱变菌株,主要表现对外源DNA的免疫缺乏。大肠杆菌DH5α是基因工程常用的宿主菌之一,相比于正常菌种缺少了一定的免疫机制。
(2)不同的表达系统和培养方法显著影响下游的处理过程,目标蛋白表达是否形成包涵体,目标蛋白表达的定位(胞内、细胞膜内、周质空间和胞外),蛋白表达的量都依赖于所选择的的表达系统。