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外泌体提取一般可分为以下几个步骤

发布时间:2023-03-10      点击次数:25
  外泌体提取是一种分离和纯化细胞外泌体的方法,这些细胞外泌体是细胞释放到细胞外的微小膜囊泡,由脂质双层包裹着一些细胞成分,如蛋白质、RNA、DNA等。
  外泌体提取的原理是通过离心法将混合液(包括培养基、生物体液等)离心,分离出不同密度的颗粒。在最终离心步骤中,细胞外泌体会被沉淀在高密度区域。然后,用生物过滤器过滤这个沉淀,将外泌体分离出来。该方法通常需要多个离心步骤才能获得纯化的外泌体,同时高压、激光和电场等技术也可以用于提取和纯化外泌体。
  具体而言,外泌体提取一般可分为以下几个步骤:
  1.培养基或生物体液的采集和初步离心:收集样品并进行低速离心(约3000 rpm),去除细胞碎片和细胞核等大颗粒;
  2.二次离心:传递液体给高速离心,通常在20000-25000 rpm下运行,将外泌体沉淀到底部;
  3.洗涤:将外泌体沉淀用PBS等缓冲液洗涤,以去除可能存在的细胞残留和其他杂质;
  4.三次离心:将洗涤后的外泌体沉淀离心以去除残留的缓冲液等;
  5.简单的纯化:用不同的技术(如生物过滤器、密度梯度离心)去除剩余细胞或化合物,并分离纯化的外泌体。
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